مقایسه ملکولی ژنوم ویروس هرپس سیمپلکس نوع 1 جداشده از بیماران ایرانی با سوش خارجی ‏‎kos‎‏ از طریق ازدیاد ژن ‏‎dna‎‏ پلی مراز ‏‎(ul30)‎‏

ویروس هرپس سیمپلکس از خانواده هرپس ویریده می باشد که عامل تبخال در انسان است و به دلیل گسترش و شیوع منحصر به فرد در جمعیت های انسانی بسیار مورد توجه می باشد. در طول 25 تا 30 سال گذشته در کشورهای مختلف تحقیقات بسیاری روی بیولوژی ملکولی و پاتوژنز این ویروس صورت گرفته است. از جمله در ژاپن ایزوله های ژاپنی را یافته اند که از نظر ‏‎rflp‎‏ با هم مشابه بوده اما با ایزوله های سایر کشورها تفاوت دارند. نتایج مشابه در سایر کشورها تفاوت معنی داری در مناطق برش آزنیمی ژنوم این ویروس در نواحی مختلف جغرافیایی و نژادهای مختلف نشان می دهد. بررسی پلی مورفیسم برخی از ژن های ضروری ویروس مانند ژن تیمیدین کیناز منجر به یافتن سوش های مقاوم به داروی آسیکلوویر شده است. در ایران ژنوم این ویروس از لحاظ ملکولی بررسی نشده است و هدف اصلی این تحقیق بررسی ملکولی ژنوم است. بدین منظور ‏‎dna‎‏ را بعد ازعفونت سلول های ‏‎vero‎‏، با روش فنل-کلروفرم استخراج نموده و بوسیله نشانگر ساخته شده از پلاسمید ‏‎pnn2‎‏ (حاوی ژن ‏‎dna‎‏ پلی مراز سوش خارجی ‏‎kos‎‏) ساترن بلات انجام شد. نتیجه مثبت آزمایش تاییدی بر وجود تیپ 1 این ویروس است. ژن ‏‎dna‎‏ پلیمراز یکی از ژن های ضروری ویروس است که برخی جهش ها در این ژن باعث مقاومت به داروی آسیکلوویر می شود. برای تکثیر این ژن، پرایمرهای ویژه ‏‎pcr‎‏ طراحی شد. محصول ‏‎pcr‎‏ توسط چند آنزیم محدودگر برش داده شد که نقشه هضم آنزیمی چهار آنزیم ‏‎hinf,haeiii,xhoi<ecori‎‏ در ایزوله ایرانی با سوش خارجی تشابه نشان داد که این خود تایید ملکولی برای ویروس ایرانی می باشد. از طرفی نقشه هضم آنزیمی ایزوله های ایرانی برای آنزیم ‏‎dpni‎‏ نسبت به سوش خارجی تفاوت نشان داد. اگر این تفاوت در سایر ایزوله های ایرانی نیز مشاهده شود می توان از آن به عنوان مارکر تشخیصی برای ایزوله های ایرانی استفاده کرد و نیز با تحقیقات زیادتر می توان سوش های مقاوم به داروی آسیکلوویر را یافت.